淋巴细胞分离液的主要成分通常包括泛影酸钠、聚蔗糖(如Ficoll)等高分子聚合物,以及注射用水等。这些成分混合后形成一种密度介于1.075~1.090之间的近似等渗溶液。其分离原理基于细胞密度差异,利用离心产生的重力加速度,使不同密度的细胞在密度梯度中得以分离。
淋巴细胞分离液使用方法:
试剂准备:根据实验需求准备适量的淋巴细胞分离液和抗凝处理的血液样本。同时,可能需要准备盐缓冲液等辅助试剂。
混合样本:将抗凝处理的血液样本与适量的淋巴细胞分离液混合,注意轻轻加入以避免剧烈搅拌导致细胞破坏。
密度梯度离心:将混合液置于离心管中,进行密度梯度离心。离心时间通常为20~40分钟,离心速度根据实验要求而定。
收集细胞:离心后,淋巴细胞会聚集在密度梯度的某一特定层。轻轻移除上层分离液和下层沉淀物后,即可收集到淋巴细胞层。
细胞洗涤:为了去除可能残留的血小板和其他杂质,通常需要对收集到的淋巴细胞进行洗涤。