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TECHNICAL ARTICLESFastDigest 缓冲液可在 4 摄氏度下储存至少 6 个月。为了长期储存直至过期,我们建议将 FastDigest 和 FastDigest 绿色缓冲液储存在 -20 摄氏度。
我们的一般建议是在 500 μL 中使用 5-10 μL 含有 100 μg DNA 的 FastDigest 酶,在 1 mL 中使用含有 100 μg DNA 的 10-20 μL FastDigest 酶。在推荐温度下将反应孵育16小时(如果特定酶容易产生星形活性,则为最长推荐的孵育时间)。最佳条件可能会有所不同,因为 DNA 的消化取决于特定 FastDigest 限制性内切酶和 DNA 底物的性质。
FastDigest 酶的浓度是专有信息。FastDigest 酶活性通过 FastDigest 单元 (FDU) 测量:1 μL 酶 (1 FDU) 在 20 μL 1X FastDigest 缓冲液中在 37 摄氏度下 5-15 分钟内裂解 1 μg DNA 底物。
是的,FastDigest 缓冲液(Cat.不。B64)和 FastDigest 绿色缓冲液(Cat.不。B71)可以单独购买。
FastDigest 绿色缓冲液具有与无色 FastDigest 缓冲液相同的性能,但可以将反应混合物直接上样到凝胶上。10X FastDigest 绿色缓冲液包括一种密度试剂和两种用于直接上样的示踪染料。蓝色染料在 1% 琼脂糖凝胶中与 3-5 kb DNA 片段一起迁移,激发峰为 424 nm。黄色染料在 1% 琼脂糖凝胶中的迁移速度比 10 bp DNA 片段快,激发峰为 615 nm。