源: 酵母来源
纯度:>98% SDS-PAGE
内毒素水平:N/O
分子量:28.93kDa
活性测定
可以使用血红蛋白作为底物来测量蛋白酶 K 活性
描述
蛋白酶 K 是一种蛋白酶,属于肽酶家族 S8。该酶已广泛表现出底物特异性,并在天然状态下降解许多蛋白质。蛋白酶 K 被蛋白酶抑制剂(如苯 )抑制。这种酶活性不受巯基修饰试剂的影响。它在 EDTA 缓冲液中稳定。
重构
打开前短暂离心样品瓶。建议在含有 0.1% 无内毒素重组人血清白蛋白的无菌 PBS 中重构蛋白质。
稳定性与储存
使用手动除霜冰箱,避免反复冻融循环。一般情况下:自收货之日起 12 个月,供货温度为 -20 至 -80°C。1 个月,复溶后在无菌条件下 2 至 8°C。3 个月,重构后在无菌条件下 -20 至 -80°C。
蛋白酶 K 储备液 - 20 mg/ml (下载 PDF 格式)
指示
1) Tris-CaCl2缓冲液 PH8.0(200 mM Tris PH8.0 + 3 mM CaCl2)
量取 5 ml 不含 RNase 的 200mM Tris 缓冲液 (pH 8.0)。
添加 1.66 毫克(3 mM)氯化钙 (CaCl2) 添加到 Tris Buffer 并溶解。
2) 5ml 储备液 (20mg/ml)
测量 2.5 ml Tris-CaCl2将缓冲液 (pH 8.0) 放入离心管中。
添加 100 mg 蛋白酶 K (YPK-K-100GM)。
轻轻混匀以溶解蛋白酶 K。
用 0.22 μm 过滤器对溶液进行消毒。
用 100% 甘油填充至 5 ml 的最终体积(添加 2.5 ml 甘油)。
混合直至溶解。
在 -20°C 下分装储存 1 年。
3) 建议工作浓度:0.05~1mg/ml
注意:蛋白酶 K 与核酸酶相互作用。为确保最大的蛋白酶 K 活性,请使用经 0.1% DEPC 处理的水