技术文章
TECHNICAL ARTICLES免疫细胞疗法在治疗多种疾病包括肿瘤方面具有巨大的前景,免疫细胞种类包括自体CAR-T、通用型CAR-T、多种来源的NK细胞,以及来源于肿瘤组织的TIL等。这些免疫疗法应用需要免疫细胞的离体扩增到高细胞密度,同时不会损失相应细胞表型和功能。
Corning淋巴细胞无血清培养基KBM591(Corning 88-591-CM,以下简称为Corning 591培养基)支持在不同激活和扩增条件下(包括基因修饰方案)对各种T细胞群体进行体外扩增和培养,并且适用于不添加自体血浆的多种免疫细胞培养,包括T细胞、NK细胞等。
Corning 591扩增T细胞能力
对于T细胞的增殖,如图1所示,起始量为2 x 106个T细胞经过CD3/CD28磁珠激活后,分别在Corning 591培养基及其他品牌培养14天,其中培养在Corning 591培养基中的T细胞在14天培养后扩增了接近300倍,总细胞量接近6 x 108个细胞,显著高于其他品牌培养基中所获得的细胞总量。
利用流式细胞术对所得细胞的表型进行分析。结果显示,培养在Corning 591培养基及品牌2培养基中的细胞CD3+/CD8+比例高于其他品牌(表1)。
图1. 从PBMC分离的T细胞在不同培养基中培养14天的生长水平
表1 在不同培养基中培养后T细胞的扩增倍数、活力及表型分析
Corning 591支持不同来源T细胞扩增
我们使用随机来源的T细胞在Corning 591培养基中使用不同的起始细胞量进行扩增。供体1和供体2来源的T细胞,经过磁珠活化后在Corning 591培养基及品牌1培养基种培养,起始培养细胞数分别为2 x 106(供体1)和1 x 106(供体2)。经过14天培养,供体1的PBMC分离的T细胞在Corning 591培养基中的扩增倍数约为300倍;供体2的PBMC分离的T细胞在Corning 591培养基中培养至12天时扩增倍数即达到了275倍(图2,图3)。由此可见,对于不同供体来源的PBMC,以及不同的起始培养细胞量,Corning 591培养基均能够支持T细胞的迅速扩增。
图2. 不同来源T细胞在Corning 591培养基中的生长水平
图3. 不同来源T细胞在培养终点时的扩增倍数
Corning淋巴细胞无血清培养基591可以满足无血清条件下大量扩增T细胞。
在Corning淋巴细胞无血清培养基591中不同供体来源的T细胞扩增倍数相较竞品培养基高出近30%。