技术文章
TECHNICAL ARTICLESExpi293表达培养基并不直接兼容ProBond或Ni-NTA纯化系统。我们推荐在用His标签的纯化操作之前进行一次缓冲体系交换或样本透析。
大多数293细胞系均能适应从传统含血清或其它无血清培养基向Expi293表达培养基中的切换按照手册中所描述的直接切换法或序贯切换法来操作,大多数293细胞系均能适应从传统含血清或其它无血清培养基向Expi293表达培养基中的切换。 注意:切换后的细胞可能无法达到与Expi293F细胞同等的高水平表达。
我们推荐使用pcDNA 3.4-TOPO TA载体(货号A14697)。这一载体含有天然的全长CMV启动子和克隆位点下游的WPRE(旱獭转录后调控元件),这两个元件均有利于基因的高水平表达(表达比pcDNA3.3 TOPO载体高大约2-3倍,而后者又比标准的pcDNA载体高2-5倍)。当然,实际表达水平还要视具体蛋白而定。