ExpiCHO 表达培养基配方中包含 GlutaMAX-I™ 试剂。可直接使用,无需添加剂。化学成分明确的配方可实现高度的重现性和批间可靠性。为了获得较高水平的瞬时蛋白表达,该培养基应与匹配的培养基补料——ExpiCHO™ 补料配合使用,后者作为 ExpiFectamine™ CHO 转染试剂盒(货号 A29129)。不推荐将 ExpiCHO 表达培养基用于贴壁细胞培养。细胞通常置于锥形瓶内,放在摇床平台上,然后放入加湿的 CO2 细胞培养箱内生长。但是培养体积可以从多孔板中的 <1 mL 扩展到生物反应器中的 >10 L。
可以用其他培养基代替 ExpiCHO 培养基来培养ExpiCHO-S细胞吗?
不可以。ExpiCHO 表达系统能够达到的产物滴度,这是因为该系统的组分经过优化,互相配合,达到最佳的蛋白表达效果。ExpiCHO 培养基是一种兼容转染的高密度生长培养基,专门用来与 Gibco ExpiCHO 养料和 ExpiFectamine CHO 增强剂搭配使用。其他培养基无法与 ExpiCHO 系统匹配,可能最终会抑制蛋白表达。
我的 ExpiCHO 表达培养基(Cat.不。A2910002)被意外冻结。我还能使用它吗?
本产品应储存在 2-8 摄氏度,不应冷冻。意外冷冻本产品的最大问题是其溶解度。如果本产品意外冷冻,我们建议将其放置在 2-8 度的环境中,让其缓慢解冻过夜。如果产品已解冻并且没有沉淀迹象,那么它应该仍然可以使用,但我们不能保证有效性。
在转染前一天将 ExpiCHO 传代培养至 3-4 x 10E6/mL 时,您是否建议将细胞沉淀并重悬于新鲜的培养基中,或者简单地更换一些培养基以将它们分解到所需的细胞密度?
在转染 ExpiCHO 细胞之前,无需在传代培养过程中更换培养基。这将变得昂贵,并且不需要条件培养基。
您建议在用早期传代时冷冻的新细胞替换 ExpiCHO 细胞之前使用多少次传代?
为了在蛋白质生产方面获得最佳性能,我们建议在转染前解冻 ExpiCHO 细胞并让它们生长 2-3 次传代。总体而言,我们不建议使用超过 ̃20 代的细胞。