FITC Annexin V 抗体的特点

1. 基本特性‌

• ‌分子量‌：35-36 kDa（重组人源Annexin V）

• ‌标记物‌：FITC（异硫氰酸荧光素），激发波长494 nm，发射波长516-518 nm（绿色荧光）

• ‌保存条件‌：-20℃避光保存，避免反复冻融

‌2. 作用机制‌

• ‌靶标结合‌：

• Annexin V是钙离子依赖性磷脂结合蛋白，特异性识别凋亡早期细胞膜外翻的磷脂酰丝氨酸（PS）‌12。

• 健康细胞中PS位于膜内侧，凋亡时通过caspase激活的刮板酶（scramblase）翻转至外侧‌13。

• ‌检测原理‌：

• FITC标记后保留PS结合能力，通过荧光信号区分凋亡细胞（绿色荧光）与正常/坏死细胞（需结合PI/7-AAD）‌

‌3. 应用场景‌

• ‌流式细胞术‌：定量凋亡细胞比例（如药物筛选、肿瘤研究）‌24。

• ‌荧光显微镜‌：直接观察组织或细胞中的凋亡信号‌35。

• ‌多重检测‌：可与其他荧光探针（如线粒体膜电位染料）联用‌

4. 实验注意事项‌

• ‌钙离子依赖‌：需含Ca²⁺的缓冲液（如1× Binding Buffer）‌14。

• ‌避光操作‌：FITC易光解，孵育和检测需避光‌25。

• ‌区分凋亡阶段‌：

• ‌早期凋亡‌：Annexin V+/PI-

• ‌晚期凋亡/坏死‌：Annexin V+/PI+‌

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