产品中心
PRODUCTS CNTER多能干细胞 (hPSC) 三系分化定量聚合酶链反应 (qPCR) 阵列设计用于表征 hPSC 及其三系分化能力。hPSC,包括胚胎干细胞 (ES) 和诱导多能干细胞 (iPS),具有自我更新的能力,能够分化为三个胚胎胚层的细胞:外胚层、中胚层和内胚层。该 qPCR 阵列提供体外定向或自发分化后未分化的 ES 和 iPS 细胞及其三系衍生物的基因表达谱,从而验证细胞系分化为三个胚层的能力。根据基因在 ES 和 iPS 细胞中与 hPSC 衍生的外胚层、中胚层和内胚层谱系细胞相比的差异表达来选择基因(Adewumi 等人;Bock 等人)。
qPCR 用于确定多个样品中基因表达的稳态 mRNA 水平的变化,通常归一化为内部对照基因的相对表达。基因特异性引物可扩增从 mRNA 逆转录的 cDNA 库中的靶序列,并且与 TaqMan® 技术一样,杂交序列特异性探针提供来自 Taq DNA 聚合酶的 5' 核酸外切酶活性的荧光信号。荧光信号的积累速率用于定量样品 cDNA,从而定量原始细胞裂解物中 mRNA 的量。
该 qPCR 芯片包含经验证的引物和探针,用于检测 90 个基因,这些基因的表达与处于分化早期阶段的未分化 hPSC 或其衍生物相关,以及 6 个内源性(管家)对照基因。TBP(TATA 盒结合蛋白)qPCR 对照模板作为合成 DNA 阳性对照提供。