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化学性质
游离态:激发/发射波长493/636 nm;
结合DNA后:535/617 nm,荧光增强20-30倍12。
分子式:C₂₇H₃₄I₂N₄,分子量:668.4,CAS号:25535-16-425。
外观:暗红色结晶,溶于水(1 mg/mL)25。
荧光特性:
作用机制
通过嵌入DNA碱基对结合,无序列偏好性(每4-5个碱基对结合1个染料)25。
膜不通透性:仅穿透死细胞或凋亡晚期细胞的破损膜,标记细胞核12。
细胞活性检测
与Calcein-AM、Hoechst等联用,区分活/死细胞(活细胞拒染,死细胞红染)23。
流式细胞术
用于细胞周期分析(G0/G1、S、G2/M期)及凋亡/坏死检测25。
荧光显微镜
染色体或细胞核复染,兼容多重荧光标记(如抗体、mRNA原位杂交)25。
溶液配制
1.0 mg/mL水溶液,可直接稀释至工作浓度(如1-50 μg/mL)13。
需避光保存(2-8℃或-20℃),有效期2年34。
操作建议
避免与含Tris或DTT的试剂混用(可能干扰荧光)2;
需RNase处理以消除RNA干扰25。
染色步骤:
注意事项:
细胞固定后,用PBS稀释PI至终浓度10-50 μg/mL;
室温避光孵育5-15分钟23。
毒性:可能刺激皮肤/眼睛(GHS07/GHS08警告),操作时需戴手套7。
降解产物:高温灭菌后生成乙醇和CO₂,无致癌风险