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同立海源AMMS®高纯度NK试剂盒套装2.0（AMMS®High Purity NK Cell Culture Kit 2.0）
产品货号：AS-26
同立海源AMMS®高纯度NK试剂盒套装2.0
产品描述
本产品适用于新鲜外周血经高纯度NK添加因子分离获得的PBMC，经体外活化扩增获得CD3-CD56+比例＞95%的NK细胞。仅限体外研究使用。
高纯度NK试剂盒套装2.0 产品特点
1、操作简单：在分血过程中20分钟完成CD3-的PBMC的富集；
2、外周血NK纯度达95%以上。
高纯度NK试剂盒套装2.0 套装组成
注意事项
1.血样要求：
①外周血 PBMC需2.5×107cells（推荐采血量50mL左右，用肝su钠真空采xue管）,建议采血后 4 小时内操作，建议做淋巴细胞亚群分析。不建议使用冻存的外周血。
2.种瓶密度：PBMC 铺瓶的起始细胞密度建议1×106个/mL，样本状态差可适当提高铺瓶密度至2×106 个/mL。
3.补液密度：补液前密度一般在 1.5~2×106 个/mL；补液后密度一般在0.6~1×106 个/mL ，不可低于 0.6×106 个 /mL。
4.培养基的使用：
① 每次补液前需要将培养基在室温下自然复温。
② 禁止将整瓶培养基放入 37℃孵箱复温，否则会加速补液培养基中细胞因子的失活。
③ 配置好的扩增培养基（含 IL-2）时效较短，建议一周左右使用完，尤其是活化前期（前 7 天）。
5.正确处理和保存血浆：具体见说明书。离心后的血浆要确保澄清。
6 .培养袋的使用：培养体积小于 1L 的时候，需要折叠培养袋再进行放置。建议使用我司推荐型号。
7 .灵活掌握补液时机：细胞扩增状态不理想时，可推迟补液时间，但是尽量不要调整补液的体积尤其注意第一 次补液的时机。 装袋后的补液体积可根据培养时间的情况进行调整。
8 .控制细胞结团：细胞装袋前，需要根据克隆团的情况充分拍散细胞。装袋后也需每天对袋子进行拍打，揉搓 肉眼观察较大的细胞团。
9 .包被时间：A 因子包被后需 4℃平放过夜。（紧急情况下可尝试 37℃包被2小时）
10. 培养初期不要随意晃动培养瓶：否则活化的克隆团容易飘起来，而降低包被因子对细胞团的活化。
11.因子的使用：为减少因子挂壁的损失，建议使用前进行离心处理，将含因子的西林瓶放入50mL离心管中，1000rpm离心1-2min。
12.设备保养：定期检查 CO2 培养箱温度、浓度并及时更换滤网。定期保养和清洁生物安全柜。
13.环境监测：定期更换初效、中效、高效过滤器，保证洁净区环境标准。
14 .固定实验耗材种类和型号：需提前评估变更型号、规格对培养效果的影响，如175cm2的培养瓶，细胞培养袋等。
15.PBMC 的收集：因分血过程中白膜层仅收集了CD3-的淋巴细胞，收获的PBMC细胞量会比未添加高纯度NK因子的细胞数少1/3-1/2。
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