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货号 | 名称 | 规格 |
6111021 | SuperCulture® L500淋巴细胞无血清培养基 Serum-Free Medium for Lymphocyte | 1000mL |
将 SuperCulture® L500 淋巴细胞无血清培养基放置室温平衡。以下均为无菌操作:
无菌分离人外周血淋巴细胞(建议使用达优人淋巴细胞分离管/分离液,
使用 SuperCulture® L500 淋巴细胞无血清培养基将分离获得的 PBMCs 按2~2.5×10 6个/mL 的浓度接种于 T75 或 T175 细胞培养瓶中,加入重组人 IFN-γ 等(建议使用达优 CIK 细胞因子套装,Cat#:6141011),37℃,5%CO2 培养箱中培养。
24hr 后,即第 1 天加入 CD3 单抗、重组人 IL-2 等,刺激 CIK 细胞的生长和增殖。
从第 4 天开始,每两天取样计数细胞浓度并根据计数结果补充新鲜的SuperCulture® L500 淋巴细胞无血清培养(含 1000U/mL 的重组人 IL-2),调整细胞浓度为 1.5×10 6 个/mL。
第 7 天左右,根据细胞培养悬液体积选择扩瓶或转入细胞培养袋,T75 培养瓶最大培养体积 40mL,T175 培养瓶最大培养体积 200mL,当培养基体积超过 200mL 时,可转入细胞培养袋中培养。
细胞增殖和细胞表面标志物检测。
保存方法:
2℃~8℃,避光保存,保持无菌,保质期 12 个月。