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产品简介
品牌：Thermofisher Scientific/赛默飞世尔
产品名称：Staining Buffer Set转录因子染色缓冲液集
型号：00-5523-00
Foxp3 转录因子流式固定破膜缓冲液经过配方设计和优化，可使用抗体对转录因子和核蛋白（例如 Foxp3 和 Ki-67）以及细胞因子和趋化因子进行染色。为了您的便利，我们已经提供了这些方案，用于在流式细胞仪上制备细胞内抗原检测用样品。
1. 准备工作液：
1）工作液D：取1份PF00011-A（Foxp3 / 转录因子固定/破膜浓缩液 4X）和3份PF00011-B（Foxp3 / 转录因子固定/破膜稀释液 1X）进行混合，混匀后备用。
2）工作液F：取1份PF00011-C（流式细胞术破膜缓冲液 10X）和9份超纯水混匀后，制备成流式细胞术破膜缓冲液（1X）备用。
2. 按照Proteintech的细胞表面流式细胞术的实验步骤中说明进行细胞表面染色。（如不需要进行细胞表面染色，略过此步骤。）
3. （表面染色后，洗涤，弃上清）每1 x 10^6/cells的EP管中加入1 mL工作液D，缓慢吹打以确保细胞重悬。在室温下避光孵育45分钟。
4. 在室温下以 400-600g 离心5分钟，弃上清，向EP管中加入2 mL工作液F，缓慢吹打以确保细胞重悬，400-600g 离心5分钟，弃上清。
5. 将细胞沉淀重悬于 100 uL 工作液F中，静置10-15min。
6. 使用抗体推荐用量 如5 uL/Test（或使用工作液F对流式抗体进行预稀释），避光孵育抗体-细胞混合物30-45min，用于检测细胞内抗原。
7. 孵育完毕后，每管中加入2 mL工作液F。
8. 在室温下以400-600g离心试管 5 分钟，然后弃上清。
9. 每管中加入2 mL工作液F。
10. 在室温下以400-600g离心试管 5 分钟，然后弃上清。
11. 将细胞沉淀重悬于加入0.2 mL工作液F中。
12. 在流式细胞仪上采集样品。
品牌：Thermofisher Scientific/赛默飞世尔
产品名称：Staining Buffer Set转录因子染色缓冲液集
型号：00-5523-00
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